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蛋白质盐析后加入双缩脲试剂是否会变紫?

发布时间:2020-11-10 12:07:32 文章来源:www.128jhs.com 采编人员:星星草

煮熟后的蛋白质会变性,但只限于二.三级的结构被破坏.(如氢键等)但是一级结构不会被破坏.也就是说肽键依然存在.所以仍然会显紫色.

由于双缩尿试剂的成分是氢氧化铜,酶有专一性,所以过氧化氢酶不会和双缩尿试剂反应,又因为酶是蛋白质,双缩尿试剂可以用来检验蛋白质,蛋白质跟双缩脲试剂反应就会形成紫色络合物!又因为双缩尿的成分是氢氧化铜,所以溶液也会显蓝色. 需要明白的事溶液仍然是蓝色,溶液中悬浮着紫色络合物!

碱性溶液中双缩脲( NH 2 一 co 一 NH 一 co 一 NH 2 )能与 Cu 2 + 产生紫红色的络合物,这一反应称为“双缩脲反应”.蛋白质分子中的肽键也能与铜离子发生双缩脲反应,溶液紫红色的深浅与蛋白质含量在一定范围内符合朗伯一比尔定律,而与蛋白质的氨基酸组成及分子质量无关.其可测定范围为 1- l0mg 蛋白质,适用于精度要求不高的蛋白质含量测定. Tris ,一些氨基酸, EDTA 等会干扰该测定.

双缩脲反应是指具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与cu2+反应,生成红紫色的络合物.所有的蛋白质均有此显色反应.双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色显色反应的试剂.它是naoh和cuso4两种溶液.在实验过程中,先在含蛋白质的溶液中加入等体积的naoh溶液,混合均匀后,再滴几滴cuso4溶液(量较少).即先后加入naoh和cuso4溶液.如果在naoh中滴几滴cuso4溶液混合后,再加入到含蛋白质的溶液中,混合液中就没有cu2+,显色反应就不会发生.除-conh-有此反应外,-conh2-,-ch2-,nh2-,-cs-cs-nh2,等基团亦有此反应.

一般分子中含有两个氨基甲酪基(即肽键:-CO-NH-)的化合物都可发生双缩脲反应,即双缩脲试剂会变紫色.这是由于在碱性溶液(NaOH)中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与铜离子(Cu2+)作用,形成紫红色络合物.比如含有蛋白类物质:蛋白质,鸡蛋,牛奶等等.

双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色.

对的,这个反应实际上是蛋白质的肽键与双缩脲试剂反应,所有蛋白质都含有肽键,所以所有的蛋白质与双缩脲试剂反应都成紫色反应.

会,多肽已经属于蛋白质了.

食物中是否含有蛋白质或蛋白质的含量多少,可用双缩脲试剂检测.在碱性溶液中,双缩脲试剂能与蛋白质反应,形成紫色络合物.由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色. 故答案为:√

酶在高温及过酸、过碱的条件下会失活,与双缩脲试剂反应并不会显紫色.

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